मानव ओस्टियोसारकोमा कोशिकाओं पर गैनोडर्मा ल्यूसिडम का कैंसर विरोधी प्रभाव

हमारे अध्ययन से पता चलता है कि गैनोडर्मा ल्यूसिडम/रेशी/लिंग्ज़ी इन विट्रो में ओस्टियोसारकोमा कोशिकाओं पर एंटीट्यूमर गुण दिखाता है।यह पाया गया कि Ganoderma ल्यूसिडम Wnt/β-catenin संकेतन को दबा कर स्तन कैंसर कोशिका वृद्धि और प्रवास को रोकता है।यह फोकल आसंजनों के विघटन और MDM2 की मध्यस्थता वाले स्लग डिग्रेडेशन को शामिल करके फेफड़ों के कैंसर को दबा देता है।Ganoderma ल्यूसिडम PI3K/AKT/mTOR मार्ग को डाउनरेगुलेट करके स्तन कैंसर को रोकता है, Ganoderma ल्यूसिडम MAPK मार्ग को अवरुद्ध करके तीव्र ल्यूकेमिया कोशिकाओं में एक एंटीट्यूमर भूमिका निभाता है।

ओस्टियोसारकोमा सेल लाइन व्यवहार्यता और प्रसार पर गैनोडर्मा ल्यूसिडम के प्रभाव का आकलन करने के लिए सीसीके -8 और कॉलोनी गठन परख ने दिखाया कि गैनोडर्मा ल्यूसिडम एमजी 63 और यू 2-ओएस कोशिकाओं के प्रसार को एक समय और एकाग्रता-निर्भर तरीके से दबा देता है, और कम कर देता है कोशिकाओं की उपनिवेश बनाने की क्षमता।

Ganoderma ल्यूसिडम प्रॉपोपोटिक जीन की अभिव्यक्ति को बढ़ाता है, और फ्लो साइटोमेट्री विश्लेषण से पता चला है कि Ganoderma ल्यूसिडम के साथ उपचार के बाद MG63 और U2-OS कोशिकाओं के एपोप्टोसिस को बढ़ाया जाता है।कोशिका प्रवास विभिन्न प्रकार के जैविक व्यवहारों का आधार है, जिसमें एंजियोजेनेसिस, घाव भरने, सूजन और कैंसर मेटास्टेसिस शामिल हैं।गैनोडर्मा ल्यूसिडम दोनों सेल लाइनों के प्रवास और आक्रमण को कम करता है और प्रसार, प्रवास और आक्रमण को रोकता है, और ओस्टियोसारकोमा कोशिकाओं के एपोप्टोसिस को प्रेरित करता है।

एबरैंट Wnt / β-कैटेनिन सिग्नलिंग कई प्रकार के कैंसर के गठन, मेटास्टेसिस और एपोप्टोसिस से निकटता से संबंधित है, Wnt / β-कैटेनिन सिग्नलिंग के अपगमन के साथ ओस्टियोसारकोमा में देखा जा रहा है।

इस अध्ययन में, डुअल-लूसिफ़ेरेज़ रिपोर्टर assays ने दिखाया कि Ganoderma ल्यूसिडम उपचार CHIR-99021-सक्रिय Wnt / β-catenin सिग्नलिंग को रोकता है।यह हमारे प्रदर्शन से और साबित होता है कि Wnt लक्ष्य जीन, जैसे LRP5, β-कैटेनिन, साइक्लिन D1 और MMP-9 का प्रतिलेखन बाधित होता है, जब ओस्टियोसारकोमा कोशिकाओं को गैनोडर्मा ल्यूसिडम के साथ इलाज किया जाता है।

पिछले अध्ययनों ने नैदानिक ​​​​नमूनों में दिखाया है कि LRP5 को सामान्य ऊतक के सापेक्ष ओस्टियोसारकोमा में अपग्रेड किया जाता है, और LRP5 की अभिव्यक्ति मेटास्टेटिक रोग और खराब रोग-मुक्त अस्तित्व के साथ संबंध रखती है, जिससे LRP5 ओस्टियोसारकोमा के लिए एक संभावित चिकित्सीय लक्ष्य बन जाता है।

β-कैटेनिन स्वयं Wnt/β-कैटेनिन सिग्नलिंग मार्ग में एक प्रमुख लक्ष्य है, और ओस्टियोसारकोमा में β-कैटेनिन की अभिव्यक्ति में काफी वृद्धि हुई है।जब β-कैटेनिन साइटोप्लाज्म से नाभिक में स्थानांतरित होता है, तो यह अपने डाउनस्ट्रीम लक्ष्य जीन की अभिव्यक्ति को सक्रिय करता है, जिसमें साइक्लिन डी 1, सी-माइक और एमएमपी शामिल हैं।

Myc प्रमुख प्रोटो-ऑन्कोजीन में से एक है और जीन अभिव्यक्ति के सक्रियण, प्रतिलेखन और निषेध को विनियमित करने में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। यह बताया गया है कि C-Myc ऑन्कोजीन का दमन उम्र बढ़ने और कई ट्यूमर सेल प्रकारों के एपोप्टोसिस को प्रेरित करता है, जिसमें शामिल हैं ओस्टियोसारकोमा।

साइक्लिन डी1 एक महत्वपूर्ण सेल चक्र जी1 फेज रेगुलेटर है और जी1/एस फेज ट्रांजिशन को तेज करता है।साइक्लिन डी1 की अत्यधिक अभिव्यक्ति कोशिका चक्र को छोटा कर सकती है और विभिन्न प्रकार के ट्यूमर में तेजी से कोशिका प्रसार को बढ़ावा दे सकती है।

MMP-2 और MMP-9 स्ट्रोमेलीसिन हैं जो बाह्य मैट्रिक्स घटकों को नीचा दिखाने की क्षमता रखते हैं, जो ट्यूमर एंजियोजेनेसिस और आक्रमण के लिए एक महत्वपूर्ण विशेषता है।

इससे पता चलता है कि Wnt / β-catenin लक्ष्य जीन ओस्टियोसारकोमा की प्रगति में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं, और इन सिग्नल नोड्स को अवरुद्ध करने से नाटकीय चिकित्सीय प्रभाव हो सकता है।

इसके बाद, हमने पीसीआर और वेस्टर्न ब्लॉटिंग द्वारा Wnt / cat-catenin सिग्नलिंग-संबंधित लक्ष्य जीन के mRNA और प्रोटीन की अभिव्यक्ति का पता लगाया।दोनों सेल लाइनों में, गैनोडर्मा ल्यूसिडम ने इन प्रोटीनों और जीनों की अभिव्यक्ति को बाधित किया।ये परिणाम आगे प्रदर्शित करते हैं कि Ganoderma ल्यूसिडम LRP5, β-catenin, C-Myc, cyclin D1, MMP-2, और MMP-9 को लक्षित करके Wnt / cat-catenin सिग्नलिंग को रोकता है।

ई-कैडरिन एक ट्रांसमेम्ब्रेन ग्लाइकोप्रोटीन है जो व्यापक रूप से उपकला कोशिकाओं में व्यक्त किया जाता है और उपकला कोशिकाओं और स्ट्रोमल कोशिकाओं के बीच आसंजन की मध्यस्थता करता है।E-Cadherin अभिव्यक्ति के विलोपन या हानि से ट्यूमर कोशिकाओं के बीच आसंजन का नुकसान या कमजोर हो जाता है, जिससे ट्यूमर कोशिकाएं अधिक आसानी से स्थानांतरित हो जाती हैं, और फिर ट्यूमर को घुसपैठ, फैलाना और मेटास्टेसाइज कर देता है।इस अध्ययन में, हमने पाया कि गैनोडर्मा ल्यूसिडम ई-कैडरिन को अपग्रेड कर सकता है, जिससे ओस्टियोसारकोमा कोशिकाओं के Wnt/β-कैटेनिन-मध्यस्थता वाले फेनोटाइप का मुकाबला किया जा सकता है।

निष्कर्ष में, हमारे परिणामों से संकेत मिलता है कि गैनोडर्मा ल्यूसिडम ओस्टियोसारकोमा Wnt / β-कैटेनिन सिग्नलिंग को अवरुद्ध करता है और अंततः ओस्टियोसारकोमा सेल गतिविधि में कमी की ओर जाता है।इन निष्कर्षों से पता चलता है कि ओस्टियोसारकोमा के उपचार के लिए गैनोडर्मा ल्यूसिडम एक उपयोगी और प्रभावी चिकित्सीय एजेंट हो सकता है, संबंधित उत्पादों में शामिल हैंगैनोडर्मा ल्यूसिडम बीजाणु तेल सॉफ़्टजैल/रीशी बीजाणु ओआईएल सॉफ्टजेल,गणोडर्मा ल्यूसिडम बीजाणु पाउडर / ऋषि बीजाणु पाउडर